分泌性中耳炎中耳積液內毒素和一氧化氮測定
中華耳鼻咽喉科雜志 1998年第4期第33卷 臨床經驗介紹
作者：徐萬春 王蘋 王秀 劉桂芝
單位：130021 長春 白求恩醫科大學第一臨床學院耳鼻咽喉科
分泌性中耳炎(OME)的病因至今尚未明確，其中細菌感染的研究備受重視，但細菌感染導致中耳積液的機理尚不完全清楚。我們通過70例OME患者85耳中耳積液中內毒素、NO(一氧化氮)的含量測定，探討細菌感染導致OME的機理。
一、材料和方法
1.臨床資料：分泌性中耳炎70例(85耳)，純音測聽、導抗測聽檢查為傳導性聾，根據病程分為急性組(＜30天)42例，慢性組(＞30天和反復發作者)28例。對照組30例，均為健康獻血者。
2.方法：無菌抽取中耳積液(0.1ml以上)，離心後取上清液置低溫冰箱保存；同時抽取患者靜脈血，分離血清備用。
內毒素測定：采用鲎試驗，以大腸桿菌標准內毒素為陽性對照，根據形成膠的軟硬程度判定結果，硬膠為強陽性，軟膠為弱陽性，未形成膠為陰性。
血清、中耳積液中NO含量測定：使用镉還原法進行檢測［1］。Greiss試劑和亞硝酸鈉購自中國軍事醫學科學院。
二、結果
1.中耳積液中內毒素、NO含量相關性：85耳積液中內毒素陽性者45耳(37例)占47.1%，雙側患耳積液中內毒素反應一致；內毒素陽性反應中耳積液中NO含量為(75.23±11.17)μmol/L，陰性反應40耳(33例)，NO含量為(38.85±8.40)μmol/L，兩組相比差異有顯著性(P＜0.01，t檢驗，下同)。OME患者血清中NO含量為(19.45±3.12)μmol/L，較對照組(7.66±0.78)μmol/L為高(P＜0.05)，而中耳積液中NO含量(69.55±10.23)μmol/L又明顯高於患者血清及正常組(P＜0.01)。
2.急、慢性OME中耳積液中NO含量：內毒素陽性反應45耳中急性OME漿液性積液29耳，慢性OME粘液性積液16耳，二者NO含量不同，粘液性積液NO含量(85.98±12.47)μmol/L高於漿液性積液(62.10±9.80)μmol/L，兩者差異有顯著性(P＜0.05)。
三、討論
內源性NO是L-精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)的作用下合成的。NOS有兩種：一氧化氮誘生酶(iNOS)及一氧化氮原生酶(cNOS)。iNOS在存在於許多免疫細胞中，受脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)及細胞因子等活性物質激活，催化產生的NO量較多。中耳粘膜組織中的巨噬細胞、白細胞內均有iNOS存在。許多研究者均從中耳積液中檢測到細菌的存在，並從慢性OME患者的中耳積液中分離到LPS。我們的實驗中，47.1%的中耳積液有內毒素的存在，且內毒素陽性的積液中NO的濃度明顯高於內毒素陰性組。推測：細菌中的LPS等活性物質刺激中耳粘膜免疫細胞，使iNOS表達量增加，致NO合成增加，而過量的NO可以直接導致組織損傷，NO的氧化產物NO2、NO3、過亞硝酸鹽具有比NO更強的細胞毒性作用，致使局部組織產生炎症、水腫，咽鼓管阻塞，導致中耳積液。
我們發現OME患者的血清中NO含量比健康人高，而中耳積液中的NO含量又較血清中者為高，可見細菌產生的內毒素也影響整個機體，但OME仍以局部病變為主。慢性組積液多為粘液性，其NO含量與急性漿液性積液相比顯著增加。因此中耳積液的濃縮也是造成NO含量增高、中耳炎遷延不愈的重要原因。在Ball等［2］的研究中，將LPS注入大鼠中耳腔，發現能夠誘導產生中耳積液，如果將LPS和L-NAME(N-nitrio-Larginine methyl ester一種NOS的抑制劑)同時注入，則中耳積液明顯減少。因此，使用特異性NOS抑制劑減少中耳粘膜NO的過度生成，有希望成為OME治療中有價值的藥物。
參考文獻
1茅惠明.血清中硝酸鹽的鍍、銅、镉還原測定法.臨床檢驗雜志，1995，13：6-8.
2Ball SS, Prazma J, Dais D, et al. Nitric oxide: a mediator of endotoxin-induced middle ear effusions. Laryngoscope, 1996, 106:1021-1027.
(收稿：1997-08-01 修回：1997-12-28)